WB(Western blot),即蛋白印跡或免疫印跡(Immunoblotting),是一項(xiàng)在分子生物學(xué)、生物化學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用非常廣泛的技術(shù)。這一技術(shù)利用抗體與組織或細(xì)胞樣品中特定蛋白的特異性結(jié)合作用,根據(jù)顯色條帶的位置和強(qiáng)弱實(shí)現(xiàn)蛋白鑒定和表達(dá)分析。
Western Blot 實(shí)驗(yàn)包括蛋白提取、濃度測定、制膠、電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、孵育抗體等操作,單個步驟就需要花費(fèi)一至數(shù)個小時,整套實(shí)驗(yàn)兩到三天才能完成,樣本或檢測指標(biāo)較多時,實(shí)驗(yàn)周期極長。由于其繁瑣的實(shí)驗(yàn)流程,稍有不慎則易出現(xiàn)無條帶、背景高、非特異性條帶等多種問題。思科捷幫您解放雙手,您提供樣本及抗體(部分內(nèi)參抗體、二抗我司可免費(fèi)提供),即可獲得完整的操作步驟、實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)報告及結(jié)果圖片。
您需要提供樣本及一抗(我司可代購)。思科捷可接收以下類型的樣本,您可以根據(jù)表格中列出的最低上樣量準(zhǔn)備樣本:
樣本類型 | 最低送樣量 | 樣本要求 |
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新鮮細(xì)胞 | 10^6細(xì)胞/樣本/指標(biāo) | (限濟(jì)南地區(qū)10-30℃季節(jié))在運(yùn)輸前將新鮮培養(yǎng)液充滿整個容器。 |
凍存細(xì)胞 | 10^6細(xì)胞/樣本/指標(biāo) | 收獲培養(yǎng)的細(xì)胞后,離心去除培養(yǎng)液,PBS洗2次,立即置液氮中快速冷凍。液氮冷凍半小時后,保存于冰箱。 |
組織樣本 | 100mg細(xì)胞/樣本/指標(biāo) | 采集新鮮組織,組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入液氮或-80°C冰箱中保存。 |
血清 | 50μL/樣本/指標(biāo) | 用促凝管采集新鮮全血,直立放置于室溫中待血液凝固(5-10min左右),離心4℃ *1000g*15min,上清即血清,分裝于離心管中,放入-80℃長期保存。 |
菌體 | 菌體濕重10mg/樣本/指標(biāo) | 選取生長對數(shù)期的新鮮菌液,離心收集菌體,直接保存或者加入蛋白裂解液,放入-80℃長期保存。 |
蛋白樣本 | 100μg/樣品/指標(biāo) | 1.根據(jù)蛋白裂解液說明書,加入適量裂解液,離心后保留上清,放入-80℃或液氮長期保存。 2.細(xì)胞樣品總蛋白濃度>1mg/mL;組織樣品總蛋白濃度10-15mg/mL。 預(yù)實(shí)驗(yàn)所需樣品總蛋白量>50μg/樣品/指標(biāo),正式實(shí)驗(yàn)所需樣品總蛋白>50μg/樣品/次。 |
項(xiàng)目 | 收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn) | 周期 |
蛋白提取 | 30元/樣 |
1-4張膜5-9個工作日
5-10張膜9-14個工作日
10張膜以上咨詢
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預(yù)實(shí)驗(yàn) | 250元/指標(biāo) | |
正式實(shí)驗(yàn)(接受裁膜) |
500元/膜 | |
正式實(shí)驗(yàn)(不接受裁膜) |
1000元/膜 | |
灰度值分析 | 200元/膜 |
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